وثيقة
Validation of Neuropilin 1 (NRP-1) as a potential prognostic biomarker for epithelial ovarian cancer : a proof of NRP-1 regulation by methylation
الناشر
Sultan Qaboos University
ميلادي
2013
اللغة
الأنجليزية
الملخص الإنجليزي
The expression of Neuropilin-1 (NRP-1) has been related to more advanced stages of malignancy in several types of cancer including Epithelial Ovarian Cancer (EOC). Epithelial to Mesenchymal Transition (EMT) is an active process in EOC, which is responsible for cancer cells invasion and metastasis. Therefore, we hypothesized that NRP-1 can be a potential biomarker for EOC and might be involved in the EMT process. In the first part of my thesis, we used immunohistochemical staining for tissue arrays containing 150 tissues of 75 cases (two core per case), among the 75 cases there were 2 normal, 3 benign and 70 EOC cases of different pathologies mainly endometrioid adenocarcinoma (27 cases), serous cystadenocarcinoma (24 cases) and mucinous cystadenocarcinoma (12 cases). In this work we noticed that NRP-1 was only expressed in tumors epithelium. Spearman's rank correlation coefficient showed a positive relationship between NRP-1 expression and two strong EMT markers, E-Cadherin and Slug ((=0. 258, p-value= 0.025) and (o =0.519, p-value <0.001) respectively). Fisher's Exact Test revealing that NRP-1 expression was tumor subtype dependent and was proportionally related with tumor grade (p=0.05). Another interesting finding was that Vimentin as a stromal protein was expressed by the epithelium of many tumors indicating their transformation. Mucinous carcinomas showed no Vimentin expression, higher expression level of E-cadherin as well as less NRP-1 and Slug expression, which supports its previous classification to be less aggressive than the other two types of EOC. In an attempt to investigate what regulates NRP-1 in EOC we assessed the pattern of NRP-1 promoter methylation in two ovarian cancer cell variants; OVCAR-3 parental and OVCAR-3-KDR1-1 derivative (VEGFR2 knockdown) and investigated the role of glycemic microenvironment on modulating this pattern. Our study was carried out on the downstream region of the transcription start site of the NRP-1 promoter. We found that NRP-1 promoter DNA methylation and demethylation are both responsible for its mode of expression in the two cell variants and that was modulated upon hypoglycemia. These results indicate that the available drugs which modulate DNA methylation can hold a promise to treat EOC subtypes depending on their expressed levels of this interesting protein.
الوصف
Thesis
المجموعة
URL المصدر
الملخص العربي
يعتبر البروتين المسمى (1- Neuropilin - 1 ( NRP من البروتينات المرتبطة بمراحل متقدمة جدا من تطور الأورام السرطانية الخبيثة بما في ذلك النوع الأكثر انتشارا من أنواع سرطان المبيض والمسمى بسرطان المبيض الظهاري (Epithelial Ovarian Cancer EOC) ولقد وجد أن عملية تحول الخلايا السرطانية من صفة الظهارية إلى الوسطية (Epithelial to Mesenchymal Transition ( EMT نشطة في هذا النوع من الورم - كباقي أنواع السرطان - وهي مسؤلة عن عملية انتقال وغزو الخلايا السرطانية للورم الخبيث. لذلك فإننا نفترض أن البروتين 1-NRP قد يكون علامة بيولوجية لسرطان المبيض الظهاري (E0C) ويمكن أن يساهم بشكل فعال في عملية التحول المذكورة آنفا (EMT). في الجزء الأول من هذه الرسالة تم استخدام تقنية الكيمياء الهيستولوجية المناعية وذلك من خلال صبغ عدد من المصفوفات المحتوية على أنسجة مبايض لعدة نساء تحتوي كل مصفوفة على ۱۰۰ نسيج له حالة لكل منها نسيجين وتتضمن هذه الأنسجة حالتين سليمتين، ۳ حالات حميدة و۷۰ حالة سرطان مبيض ظهاري حالات سرطان المبيض الظهاري كانت مصنفة إلى عدة أنواع للمرض سرطان غدي شبيه ببطانة الرحم(endometrioid adenocarcinoma) سرطان غدي کيسي مصليserous cystadenocarcin - ( (oma وسرطان غدي کيسي مخاطي mucinous) (Cystadenocarcinoma. من خلال هذا البحث وجدنا أن (1-(NRP قد ظهر تعبيره فقط في الجزء الظهاري لأنسجة الورم وان هناك علاقة طردية موجبة بين تعبير هذا البروتين (1-NRP) وتعبير اثنان من أهم البروتينات المسؤلة عن عملية التحول (EMT) وهما ( E - Cadherin)و(Slug) اعتمادا على معامل ارتباط سبيرمان. اضافة إلى ذلك أظهر اختبار فيشر أن تعبير(1-NRP )كان معتمدا على نوع المرض (الورم الضافة الى كونه متناسب مع درجة الورم ( 0 . 05=p). أحد أهم الملاحظات الأخرى في هذه الدراسة هي ان (Vimentin) المعروف على أنه بروتين اللحمة المتوسطة تم تعبيره من قبل الخلايا الظهارية لأنسجة الورم كإشارة لعملية التحول من صفة الظهارية إلى الوسطية (EMT).وقد أظهرت الأورام من نوع السرطان الغدي الكيسي المخاطي(mucinous cystadenocarcinoma) علم تعبيرها للبروتين (Vimentin بينما كان تعبيرها للبروتين ( E - Cadherin) عاليا مقابل مستوى تعبير منخفض لكل من المسمى (1-NRP) و(Slug). هذه الملاحظات توافقت مع الحقيقة المعروفة بشأن هذا النوع لسرطان المبيض الظهاري (E0)وهي كونه أقل عدوانية من النوعين الأخرين.وكمحاولة لمعرفة مايتحكم بجين (1-NRP) في هذا النوع من الورم قمنا في الجزء الثاني من هذه الرسالة بدراسة نمط عملية اضافة مجموعة الميثيل الحامض النووي (DNA methylation) في المنطقة التنظيمية لجين (1-NRP) في نوعين من أنواع خلايا سرطان المبيض وهما(3-OvCAR الخلايا الأم و (1- OvCAR - 3 - KDR1 )خلايا أم معدلة وراثيا، وتحديد دور توفر الجلوكوز على هذا النمط وقد أجريت الدراسة تحديدا على المنطقة الواقعة تحت موقع" بدء النسخ" في المنطقة التنظيمية لجين (1-NRP) حيث وجدنا أن عملية اضافة مجموعة الميثيل للحامض النووي ونزعها مسؤلان عن نمط تعبير هذا الجين في نوعي الخلايا المذكورين وأن هذا النمط يخضع لتأثيرنقص السكر في الدم . وهذه النتائج تشير إلى أن العقاقير المتاحة التي تتحكم بعملية اضافة مجموعة الميثيل للحامض النووي قد توجد أملا لعلاج أنواع سرطان المبيض الظهاري (EOC) اعتمادا على مستويات كل منها في تعبير هذا البروتين
قالب العنصر
الرسائل والأطروحات الجامعية
حجم الملف
10.8 ميغا بايت
0
0
