Document
Exploring alterations of B regulatory cells in patients with sickle cell disease and systemic lupus erythematous
Publisher
Sultan Qaboos University
Gregorian
2016
Language
English
Subject
English abstract
Sickle cell disease (SCD) is a group of inherited red blood cell disorders, which is highly prevalent in Oman where 0.3% of the population is affected. As a result of repeated cycles of inflammation, infection and tissue damage, SCD patients are at an increased risk of developing connective tissue disorders (CTD) such assystemic lupus erythematous (SLE). This latter is the most common CTD inOman whereby the incidence of SLE in SCD patients is 3.09%, which is higher than the general population. Although the underlying mechanisms are not fully understood, recent findings suggest that B regulatory (Breg) cells may play a vital role in maintaining immune homeostasis and self-tolerance. It has been shown that any dysregulation of Breg cells may lead to the development of CTD. Therefore, this study aims at exploring alterations of Breg cells in the peripheral blood of SCD patients with SLE. To this end, four groups were studied including SCD patients with SLE (n=21), patients with SCD only (n=24), patients with SLE only (n=24) and healthy controls (n=24). The American College of Rheumatology (ACR) criteria was used to classify and diagnose SLE patients. SickleDex® test was used to screen for Hbs while HPLC was used to confirm whether the participants had SCD. Circulating levels of Breg cells were assessed by immuno-phenotyping using specific surface markers and flow cytometry. The functional properties were evaluated by interleukin-10 (IL-10) production and STAT3 phosphorylation after stimulation and cell culture. Correlations of demographic, hematological and clinical parameters with the numerical and functional properties of Breg cells were evaluated. The demographic data were similar among the study groups. All participants were free of infections such as human immunodeficiency virus, hepatitis B and C virus and syphilis. SCD patients with SLE and patients with SLE only were positive for autoimmune markers and showed an average ACR score of five and six respectively. The frequency of Breg cells ranged between 1.5-8% in healthy controls. The circulating levels of Breg cells were significantly reduced in SCD patients with or without SLE and patients with SLE only when compared to the healthy controls (p<0.0001). Similarly, compared to healthy controls, Breg cells from SCD patients with or without SLE and patients with SLE only produced significantly lower amount of IL-10 (p<0.0001). Likewise, STAT3 phosphorylation was also decreased in Breg cells from SCD patients with or without SLE and patients with SLE only compared to the healthy controls (p<0.0001). Demographic and hematological data along with the treatments did not affect the levels and functions of Breg cells. Most of the associations did not reach a statistical significance, except a moderate correlation was evidenced between production of IL-10 by Breg cells and antinuclear a lear antibody titer (p=0.52, p=0.009). Collectively, these findings showed numerical and functional deficits of Breg cells in SCD patients with or without SLE and patients with SLE only. This implies that Breg cell capacity to maintain tolerance and control inflammation is imbalanced in SCD patients therefore favoring development of SLE.
Description
Thesis
Member of
Resource URL
Arabic abstract
مرض فقر الدم المنجلي ( Sickle cell disease أو SCD) هو مجموعة من الاختلالات الوراثية التي تصيب كريات الدم الحمراء، ما يقارب 0. 3 % من سكان سلطنة عمان مصابون بهذا المرض. ونتيجة لتكرار عمليات الالتهاب والعدوى وتلف الأنسجة عند مرضى فقر الدم المنجلي فإن هذا يؤدي إلى ظهور امراض التهابات الانسجه (connective tissue disease أو CTD ) مثل مرض الذئبة الحمراء (Systemic Lupus Erythematosus) ، يعتبر مرض الذئبة الحمراء هو الأكثر شيوعا في عمان ، حيث تقدر نسبة مرضى فقر الدم المنجلى المصابين بمرض الذئبة الحمراء 3 . 09 % . على الرغم من أن السبب الرئيسي في حدوثه غير مفهوم تماما، إلا أن بعض الدراسات تشير إلى أن بعض الخلايا اللمفاوية البائية وتحديدة خلية باء المنظمة (B regulatory cells , Breg ) قد تلعب دورا حيويا في الحفاظ على التوازن في مناعة الجسم. ولقد ثبت أن أي تقلبات في هذه الخلايا قد تؤدي إلى اضطرابات في الأنسجة مما يساعد في ظهور مرض الذئبة الحمراء SLE ولذلك، تهدف هذه الدراسة إلى استكشاف التغيرات في خلايا الباء المنظمة (Breg) في المرضى الذين يحملون فقر الدم المنجلي (SCD) مع مرض الذئبة الحمراء (SLE) معا. تم دراسة أربع مجموعات بما في ذلك مرضى فقر الدم المنجلي SCD مع مرض الذئبة الحمراء (العدد = 21)، المرضى الذين يعانون من فقر الدم المنجلي SCD فقط (العدد = 24)، المرضى الذين يعانون من مرض الذئبة الحمراء فقط (العدد = 24) والأشخاص الذين لا يعانون من شيء أو الأصحاء (العدد = 24). وقد تم تصنيف مرضى الذئبة الحمراء ELS بناء على معايير وضعتها الكلية الأمريكية لأمراض الروماتيزم (ACR), كما استخدم اختبار SickleDex للكشف عن الهيموغلوبين س (HbS) بينما ستخدم HPLC لتأكيد من تشخيص مرضى فقر الدم المنجلي SCD. بالإضافة إلى أنه تم تقييم مستوى الخلايا لنفاوية البائية المنظمة في المجرى الدموي (Breg) عن طريق الكشف على العلامات الموجودة على سطح الخلايا ود لك عن طريق جهاز التدفق الخلوي. ويعد ما تمت زراعة الخلايا في المختبر ، فقد تم تقييم الخصائص الوظيفية لها عن طريق قياس انتاجها البروتين اتترلوكين-10 ( 10-IL)وفسفرة البروتين STAT3. ومن ثم فقد تم تقييم الارتباط ما بين العوامل التي تم جمعها في الدراسة والتغييرات الوظيفية و المعلمات السريرية والعددية لخلايا لنفاوية البائية المنظمة Breg. كانت البيانات الديموغرافية متماثلة بين المجموعات المختارة للدراسة. وكان جميع المشاركين من دون أي إصابة بعدوى مثل فيروس نقص المناعة البشرية والتهاب الكبد B و C فيروس ومرض الزهري. أظهرت النتائج أن درجة ACR لدى مرضى فقر الدم المنجلي SCD مع مرض الذئبة الحمراء كانت خمسة ، وكانت هذه الدرجة ستة بالنسبة لمرضى الذئبة الحمراء فقط. لقد تراوحت نسبة تواجد خلايا باء المنظمة Breg في الأصحاء بين 1. 5 -.8 % كما أن نسبة خلايا باء المنظمة Breg كانت منخفضة جدا لدى مرضى فقر الدم المنجلي SCD مع أو بدون مرضى الذئبة الحمراء أو مرضى الذئبة الحمراء فقط مقارنة بالأصحاء ( 0 . 0001>p) . كما أنه بالمقارنة مع الأصحاء ، فإن انتاج خلايا باء المنظمة Breg ل انترلوكين-10 وفسفرة البروتين STAT3 ، لكل من مرضی فقر الدم المنجلي SCD مع مرض الذئبة الحمراء أو بدونها او مرضى الذئبة الحمراء فقط ، كانت قليلة جدا ( 0 . 0001>p). لم يؤثر العلاج أو البيانات الديموغرافية والدموية على مستويات ووظائف خلايا باء المنظمة Breg. كما أنها لم تعط إحصائية كافية بين العوامل التي تم جمعها بالدراسة وبين خلايا باء المنظمة ، باستثناء ، وجود علاقة بين إنتاج انترلوكين-10 من قبل خلايا البائية المنظمة Breg والعيار المستخدم ضد نواة المضاد الموجود على سطح الخلية ( p = 0 . 009 ) ( ANA ,0 . 52= م). بشكل عام، أظهرت هذه النتائج العجز في عدد ووظيفة خلايا اللمفاوية البائية المنظمة لدى مرضى فقر الدم المنجلي مع أو بدون مرضى الذئبة الحمراء أو مرضى الذئبة الحمراء فقط. وهذا يعني أن قدرة خلايا لنفاوية البائية المنظمة للحفاظ على التوازن والسيطرة على الالتهابات في المرضى الذين يعانون من فقر الدم المنجلي مختلة لذلك يصابون بمرض الذئبة الحمراء
Category
Theses and Dissertations
File size
1.76 MB
0
0
