Document
Neutralization of local haemorrhage using phoenix dactylifera L. Ajwa date fruit extract
Publisher
Sultan Qaboos University
Gregorian
2017
Language
English
English abstract
Abstract
Background: Envenomation by snakebites is a serious crisis that covers almost the whole globe, especially, Asia and Africa. This leads to either morbidity (with deformation of skin and muscles leading to disability after recovery from necrosis and haemorrhage) and/or mortality. Local haemorrhage is an important manifestation due to snake envenoming with no known treatment, Unfortunately, the only approved therapy available is the use of commercialized anti-venom even though it is not efficient to neutralize local haemorrhage. Objectives: To evaluate the efficacy of Phoenix dactylifera L. Ajwa date fruit extract in neutralizing local haemorrhage induced by three clinically important snakes' venoms. Furthermore, to isolate the active components from the Ajwa date fruit and examine each of which for its local haemorrhage neutralization capacity. Methodology& Results: Ajwa date fruit was extracted using three solvents and extracts were examined for their anti-local haemorrhage activity using in vitro and in vivo assays. Only the crude ethanolic extract (CEE), was found to be potentially effective both in vitro and in vivo in neutralizing the local hemorrhagic effects induced by venoms obtained from three clinically important snakes (Bothrops jararaca, Crotalus atrox and Echis carinatus). The CEE was fractionated using High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and 140 different fractions (Frc) were obtained. These fractions were examined for their anti local haemorrhage and anti-lethal activities. Only four out of the 140 fractions were found to be significantly effective [namely; Frc24, Frc25, Frc28 & Frc32] against individual and pooled venoms of the three snakes' venoms together using both in vitro and in vivo assays and analyzed using Mann-Whitney analysis with p<0.05. Characterization and identification of the isolated active fractions was performed using the Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF) and mass bank searches. Only Frc25 showed peaks, whereas the other fractions were found difficult to be processed further due to lacking of purity. Mass bank search analysis of Fro25 showed two peaks and identified as: (i) Steroids and (ii) Flavonoid, Phytochemicals test showed that both the CEE and the four fractions (Frc24, Frc25, Fro28 and Frc32) contain carbohydrates (glucose) only and no other constituents. The active fractions as well as the CEE were further examined for their anti-lethality (LD100) in vivo against pooled venoms [Bothrops jararaca (30mg/0.03kg), Crotalus atrox (50mg/0.03kg) and Echis carinatus (50mg/0.03kg)] and the results found to be potentially significant by elongating the time of survival of the tested animals in comparison to that of the control animals (P<0.05). Furthermore, the optimum concentrations of the CEE for the anti-lethality of LDso test using 27.5mg/0.03kg of B. jararaca venom were significant (P<0.05) at concentrations of 200 and 300 u1/0.03kg. Conclusion: The active components from the Phoenix dactylifera L Ajwa date fruit that have the capacity to neutralize the local haemorrhage were isolated. These isolated active components shows both in vitro and in vivo the capacity to cross react and neutralize 100% of the local haemorrhage effects caused by the three clinically important snake venoms
Member of
Resource URL
Arabic abstract
الملخص
المقدمة: التسمم بعضات الثعابين هو من أضخم الأزمات التي تغطي تقريبا العالم كله، وخاصة: آسيا وأفريقيا. التسمم بلدغات الثعابين يؤدي إلى العاهات والأمراض المزمنة (تشوه الجلد والعضلات مما يؤدي إلى الإعاقة بعد التعافي من النخر والنزيف) و الوفيات. النزف الموضعي هو أحد أهم الأضرار التي تسببها سموم الثعبانين وبالرغم من ذلك، لا يوجد هناك علاج يمكنه ان يحد, يمنع از يعالج هذه المشكلة. حيث أن العلاج الوحيد المعتمد، و المتوفر تجاريا لمكافحة سموم الأفاعي، لا يمكنه معالجة النزيف الداخلي الموضعي. الهدف: تهدف هذه الدراسة إلى تقييم فعالية تمر العجوة على تحييد و علاج النزيف الموضعي الناجم عن ثلاثة سموم مستخلصة من ثلاثة ثعابين مختلفة معروفة بحدة أضرارها وانتشارها حول العالم. و ايضا استخلاص وتحديد المكونات و المركبات النشطة و الفعالة المسؤولة عن فاعلية تمر العجوة ضد سموم الثعابين. الطريقة والنتاج: تم استخلاص عدة مركبات من تمر العجوة باستخدام ثلاثة محاليل واختبارها لقدرتها في الحد من النزيف الموضعي باستخدام التجارب المخبرية (in vitro & in vivo). أوضحت النتائج أن المحلول الايثانولي فقط لدية القدرة على الحد من النزيف الموضعي الناجم عن سم البوثروبس جراراكا (0. 3 مایکرولیتر/ 0, 03 كيلوجرام), الكروتالوس آتروكس (16مايکرولیتر/ 0, 03 كيلوجرام) والسموم الثلاثة مجتمعية والبوئرو بس جاراراکا
( 0 . 3مایکرولیتر/ 0, 03 كيلوجرام) , الكروتالوس آتروکس (16مایکرولیتر/ 0, 03 كيلوجرام) و الإكيس كاريناتوس
(8مایکرولیتر/ 0, 03 كيلوجرام) في الفئران باستخدام التجارب المخبرية. ومن ذلك, تم تجزئة المركبات في محلول الايثانولي الخام باستخدام جاز ال HPLC حيث تم استخلاص 140 مركب وجزيء. تم فحص هذه المركبات باستخدام الفئران ضد سموم الثعابين المجتمعة والمتفرقة اوضح لدينا ان أربعة مركبات فقط لديها القابلية لتنقية معالجة النزيف الداخلي الموضعي بإستخدام نوعين من التجارب المخبرية و قد تم تحليل النتائج باستخدام قاعدة Mann - Whitney
.(p< 0,05) تم تحليل هذه المركبات الأربعة باستخدام تقنية الإمتزاز / التأين بمساعدة الليزر لحساب الوقت مع كتلة الطيران MALDI - TOF . المركب 25 فقط أظهر منحنيات حيث وجدنا أن ثلاثة مركبات تنقصها النقاوة حيث أن القراءات توضح وجود شوائب تحد من قراءة المركبات. مركب 25 أوضح احتواؤه على ثلاثة مركبات وتم تحليل اثنان فقط عن طريق بحث التطاير لتحديد/تعيين بواسطة برنامج المطابقة للأحماض في المعلومات الالكترونية (BLAST
- P ) ، ووجد أنها تحتوي على فلافونويد و ستيرويد. كما تم تحليل المركبات الكيميائية للمحلول الايثانولي وللمركبات النشطة المركب24, المركب25, المركب 28 والمركب32) ووجد أن جميعها تحتوي على مركب الجلوكوز. فحص مكافحة الفتك للجرعة الفتاكة (LD100) التي تقتل جميع الفئران المختبرة مستخدمين السموم الثلاثة مجتمعة (البوتروبس
جاراراكا (30 مج / 03,كم), الكروتالوس آتروكس (50 مج / 0, 03كم) و الإكيس كاريناتوس (50 مج / 03 ,0 كم) تم اختباره على المركبات النشطة وعلى المحلول الإيثانولي: حيث اشارت النتائج إلى أن المركبات لديها القدرة على تمديد فترة بقاء الفئران على قيد الحياة بالمقارنة مع الفئران المرجعية (p < 0, 05) ( control ). و تم فحص الجرعة المناسبة من المحلول الإيثانولي القادرة على مقاومة الفتك النصفي بسم ثعبان البوثروبس جاراراكا (27 . 5 مج/ 0, 03کج) الذي يفتلك بنصف عدد الفئران المختبرة (LD50) . حيث وجد أن افضل النتائج كانت عندما كانت الجرعات أكثر من 200 و 300 مایکرولیتر 0, 03 كيلوجرام ( 0, 05 >p). الإستنتاج: تم استخلاص الجزيء الفعال من المستخلص الإيثانولي لثمار النخيل المجففة الفينيكس داكتيليفيرا "العجوة الذي اثبتت فعاليته في الحد من النزيف الموضعي. حيث اثبت هذا الجزيء لديه قدرته خلال التجارب المخبرية التجريبية (in vivo & in vitro) على تنقية معالجة 100% من النزيف الموضعي الناجم عن انواع مختلفة من الثعابين سواء كانت فردية أو مجتمعة.
المقدمة: التسمم بعضات الثعابين هو من أضخم الأزمات التي تغطي تقريبا العالم كله، وخاصة: آسيا وأفريقيا. التسمم بلدغات الثعابين يؤدي إلى العاهات والأمراض المزمنة (تشوه الجلد والعضلات مما يؤدي إلى الإعاقة بعد التعافي من النخر والنزيف) و الوفيات. النزف الموضعي هو أحد أهم الأضرار التي تسببها سموم الثعبانين وبالرغم من ذلك، لا يوجد هناك علاج يمكنه ان يحد, يمنع از يعالج هذه المشكلة. حيث أن العلاج الوحيد المعتمد، و المتوفر تجاريا لمكافحة سموم الأفاعي، لا يمكنه معالجة النزيف الداخلي الموضعي. الهدف: تهدف هذه الدراسة إلى تقييم فعالية تمر العجوة على تحييد و علاج النزيف الموضعي الناجم عن ثلاثة سموم مستخلصة من ثلاثة ثعابين مختلفة معروفة بحدة أضرارها وانتشارها حول العالم. و ايضا استخلاص وتحديد المكونات و المركبات النشطة و الفعالة المسؤولة عن فاعلية تمر العجوة ضد سموم الثعابين. الطريقة والنتاج: تم استخلاص عدة مركبات من تمر العجوة باستخدام ثلاثة محاليل واختبارها لقدرتها في الحد من النزيف الموضعي باستخدام التجارب المخبرية (in vitro & in vivo). أوضحت النتائج أن المحلول الايثانولي فقط لدية القدرة على الحد من النزيف الموضعي الناجم عن سم البوثروبس جراراكا (0. 3 مایکرولیتر/ 0, 03 كيلوجرام), الكروتالوس آتروكس (16مايکرولیتر/ 0, 03 كيلوجرام) والسموم الثلاثة مجتمعية والبوئرو بس جاراراکا
( 0 . 3مایکرولیتر/ 0, 03 كيلوجرام) , الكروتالوس آتروکس (16مایکرولیتر/ 0, 03 كيلوجرام) و الإكيس كاريناتوس
(8مایکرولیتر/ 0, 03 كيلوجرام) في الفئران باستخدام التجارب المخبرية. ومن ذلك, تم تجزئة المركبات في محلول الايثانولي الخام باستخدام جاز ال HPLC حيث تم استخلاص 140 مركب وجزيء. تم فحص هذه المركبات باستخدام الفئران ضد سموم الثعابين المجتمعة والمتفرقة اوضح لدينا ان أربعة مركبات فقط لديها القابلية لتنقية معالجة النزيف الداخلي الموضعي بإستخدام نوعين من التجارب المخبرية و قد تم تحليل النتائج باستخدام قاعدة Mann - Whitney
.(p< 0,05) تم تحليل هذه المركبات الأربعة باستخدام تقنية الإمتزاز / التأين بمساعدة الليزر لحساب الوقت مع كتلة الطيران MALDI - TOF . المركب 25 فقط أظهر منحنيات حيث وجدنا أن ثلاثة مركبات تنقصها النقاوة حيث أن القراءات توضح وجود شوائب تحد من قراءة المركبات. مركب 25 أوضح احتواؤه على ثلاثة مركبات وتم تحليل اثنان فقط عن طريق بحث التطاير لتحديد/تعيين بواسطة برنامج المطابقة للأحماض في المعلومات الالكترونية (BLAST
- P ) ، ووجد أنها تحتوي على فلافونويد و ستيرويد. كما تم تحليل المركبات الكيميائية للمحلول الايثانولي وللمركبات النشطة المركب24, المركب25, المركب 28 والمركب32) ووجد أن جميعها تحتوي على مركب الجلوكوز. فحص مكافحة الفتك للجرعة الفتاكة (LD100) التي تقتل جميع الفئران المختبرة مستخدمين السموم الثلاثة مجتمعة (البوتروبس
جاراراكا (30 مج / 03,كم), الكروتالوس آتروكس (50 مج / 0, 03كم) و الإكيس كاريناتوس (50 مج / 03 ,0 كم) تم اختباره على المركبات النشطة وعلى المحلول الإيثانولي: حيث اشارت النتائج إلى أن المركبات لديها القدرة على تمديد فترة بقاء الفئران على قيد الحياة بالمقارنة مع الفئران المرجعية (p < 0, 05) ( control ). و تم فحص الجرعة المناسبة من المحلول الإيثانولي القادرة على مقاومة الفتك النصفي بسم ثعبان البوثروبس جاراراكا (27 . 5 مج/ 0, 03کج) الذي يفتلك بنصف عدد الفئران المختبرة (LD50) . حيث وجد أن افضل النتائج كانت عندما كانت الجرعات أكثر من 200 و 300 مایکرولیتر 0, 03 كيلوجرام ( 0, 05 >p). الإستنتاج: تم استخلاص الجزيء الفعال من المستخلص الإيثانولي لثمار النخيل المجففة الفينيكس داكتيليفيرا "العجوة الذي اثبتت فعاليته في الحد من النزيف الموضعي. حيث اثبت هذا الجزيء لديه قدرته خلال التجارب المخبرية التجريبية (in vivo & in vitro) على تنقية معالجة 100% من النزيف الموضعي الناجم عن انواع مختلفة من الثعابين سواء كانت فردية أو مجتمعة.
Category
Theses and Dissertations
File size
7.89 MB
0
0
